BIO-WORKS
Złoża chromatograficzne WorkBeads, wykonane z sieciowanej agarozy, zostały zaprojektowane z myślą o efektywnej separacji biomolekuł przy zastosowaniu różnych technik chromatografii cieczowej, takich jak chromatografia powinowactwa, jonowymienna, hydrofobowa czy żelowa. Dzięki starannie opracowanej strukturze charakteryzują się wysoką rozdzielczością, pozwalającą na precyzyjne rozdzielanie składników mieszanin, oraz znakomitą wytrzymałością mechaniczną, co umożliwia ich wykorzystanie nawet w warunkach pracy z wysokimi prędkościami przepływu, typowymi dla procesów preparatywnych i przemysłowych.
Rozmiary drobin złóż zostały zoptymalizowane pod kątem różnorodnych zastosowań i wynoszą od 40 do 200 mikrometrów, co gwarantuje odpowiednią równowagę między wydajnością separacji a przepuszczalnością. Takie parametry sprawiają, że WorkBeads doskonale sprawdzają się zarówno w aplikacjach laboratoryjnych, jak i w większej skali produkcyjnej.
Złoża WorkBeads są dostępne w różnych formach – w postaci zawiesin, które umożliwiają użytkownikom samodzielne pakowanie kolumn chromatograficznych o dowolnych wymiarach i konfiguracjach, jak również w postaci gotowych, wstępnie zapakowanych kolumn, które można natychmiast wykorzystać w procesach analitycznych i produkcyjnych. Taka elastyczność pozwala dostosować rozwiązania do specyficznych potrzeb i wymagań użytkowników, niezależnie od skali i rodzaju prowadzonych prac.
Kolumny
Złoża
Chromatografia powinowactwa (Affinity Chromatography - AC)
Wykorzystuje odwracalną interakcję między biomolekułami (lub grupą biomolekuł) a określonym ligandem sprzężonym z matrycą chromatograficzną. Technika ta jest idealna do wychwytywania przez ligand docelowej cząsteczki w protokole oczyszczania (ligand fishing). Oczyszczane cząsteczki uzyskuje się w wysoce czystej i skoncentrowanej postaci w jednym kroku chromatograficznym.
Jako przykład może służyć izolowanie i oczyszczanie przeciwciał. Zarówno przeciwciała monoklonalne, jak i poliklonalne, mogą być wiązane odwracalnie z unieruchomionym na powierzchni złoża ligandem przez region Fc przeciwciała. Do oczyszczania przeciwciał dostępne są złoża WorkBeads affimA oraz WorkBeads Protein A.
Złoże WorkBeads affimA (50 µm) charakteryzuje się wysoce dynamiczną zdolnością wiązania przeciwciał (> 40 mg ludzkiej IgG/mL złoża) przy dużej łatwości ich elucji. Złoże jest wysoce stabilne w szerokim zakresie pH (3-12) co pozwala na wielokrotne jego użycie, przy niskiej utracie immobilizowanego liganda. Użycie tego złoża gwarantuje doskonałą czystość uzyskanych przeciwciał i wysoką powtarzalność rozdziałów. Złoże WorkBeads affimA dostępne jest zarówno w postaci zawiesiny przeznaczonej do samodzielnego upakowania kolumny, jak i w kilku rodzajach kolumn GoBio.
Złoże WorkBeads Protein A (45 µm) przeznaczone jest do rutynowych prac laboratoryjnych. Posiada również wysoce dynamiczną zdolność wiązania przeciwciał, porównywalną czystość uzyskanych przeciwciał i wysoką powtarzalność rozdziałów. Złoże stabilne jest w szerokim zakresie pH (3-10). Złoże WorkBeads Protein A dostępne jest zarówno w postaci zawiesiny przeznaczonej do samodzielnego upakowania kolumny, jak w kolumnach GoBio Mini (1 mL i 5 mL).
Chromatografia powinowactwa z immobilizowanymi jonami metali (Immobilized Metal-ion Affinity Chromatograph – IMAC)
Jest innym rodzajem chromatografii powinowactwa pozwalającą na separację większości białek z odsłoniętymi na ich powierzchni aminokwasami: histydyną, cysteiną lub tryptofanem. IMAC jest doskonałą techniką optymalizacji i oczyszczania białek ze znacznikiem histydynowym (His-tag). Technika ta jest idealna do wychwytywania białka bezpośrednio ze sklarowanego lizatu komórkowego. Białko docelowe jest zbierane w wysoce oczyszczonej i skoncentrowanej postaci. Kilka czynników wpływa na ostateczną czystość białka znakowanego His-tag oczyszczonego tą metodą. Zależy to od położenie znacznika (C- lub N-końcowe), długości znacznika, unieruchomionego jonu metalu (Ni2+, Co2+, Zn2+, Cu2+) i rodzaju liganda wiążącego jony metali (NTA lub IDA). Dla łatwej optymalizacji procesu oczyszczania białek ze znacznikiem His-tag firma Bio-Works oferuje produkty z wieloma kombinacjami jonów metali i unieruchomionych ligandów dostępnych w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn oraz w kilku rodzajach kolumn GoBio:
– WorkBeads 40 Ni-NTA
– WorkBeads 40 Co-NTA
– WorkBeads 40 Zn-NTA
– WorkBeads 40 Cu-NTA
– WorkBeads 40 Ni-IDA
– WorkBeads 40 Co-IDA
– WorkBeads 40 Zn-IDA
– WorkBeads 40 Cu-IDA
a także zestawy GoBio Mini His-tag NTA Screening kit i GoBio Mini His-tag IDA Screening kit.
Chromatografia powinowactwa - Wstępnie aktywowane złoża
Umożliwiają wygodną i skuteczną immobilizację ligandów na złożu bez konieczności użycia skomplikowanych procedur. Oferowane są dwa różne wstępnie aktywowane złoża WorkBeads 40/1000 ACT i WorkBeads
40/10 000 ACT (z limitami odcięcia odpowiednio 1200 kDa i 10000 kDa), w których aktywna grupa bromohydryny reaguje z grupami tiolowymi, aminowymi i hydroksylowymi. Złoża dostępne są w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn, a złoże WorkBeads 40/1000 ACT dostępne jest w formie upakowanych kolumn GoBio Mini (1 mL i 5 mL).
Schemat reakcji prowadzącej do immobilizacji liganda
Chromatografia jonowymienna (Ion Exchange Chromatography - IEX)
Jest bardzo przydatną techniką rozdzielania białek na podstawie różnic ich elektrycznego ładunku powierzchniowego netto w stosunku do pH otoczenia. Każde białko ma swój własny stosunek ładunku do pH. Technika IEX jest odpowiednia dla większości białek, peptydów, wirusów, szczepionek i oligonukleotydów. IEX to uniwersalna technika odpowiednia na wszystkich etapach oczyszczania.
Chromatografia wykluczania (Size Exclusion Chromatography - SEC)
Zwana także filtracją żelową (Gel Filtered Chromatography – GFC), służy do rozdziela cząsteczek na podstawie różnic w ich wielkości. Ponieważ jest to technika niewiążąca, wybór buforów roboczych jest duży i można je zoptymalizować pod kątem cząsteczki docelowej. Aby uzyskać najlepszą rozdzielczość podczas korzystania z SEC, należy zastosować małą prędkość przepływu i objętość próbki wynoszącą maksymalnie 4% objętości kolumny. Dlatego ta technika najlepiej nadaje się do etapu doczyszczania białek, peptydów, wirusów, białek i peptydów znakowane oraz oligonukleotydów. Dostępnych jest kilka różnych rozmiarów porowatości złóż WorkBeads SEC przeznaczonych dla separacji makrocząsteczek o różnych rozmiarach:
• WorkBeads 40/100 SEC (zakres separacji 10-150 kDa)
• WorkBeads 40/1000 SEC (zakres separacji 10-1200 kDa)
• WorkBeads 40/10 000 SEC (zakres separacji 10-10000 kDa)
• WorkBeads Macro SEC (zakres separacji 10-30000 kDa)
• WorkBeads 200 SEC (zakres separacji 10-6000 kDa).
Oferowane złoża wyprodukowane zostały przy wykorzystaniu unikalnej, zastrzeżonej metody sieciowania, która pozwala na otrzymanie wysoce porowatych, ale fizycznie stabilnych ziaren złoża odpornego na silne środki stosowane do jego czyszczenia. Złoża dostępne są w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn, oraz w formie gotowych do użycia kolumn GoBio.
Wymiana buforu/odsalanie
Chromatografia wykluczania prowadzona na złożach o niskiej porowatości pozwala na szybką i łatwą wymianę buforu i/lub odsalanie próbki. Odsalanie odbywa się przy objętościach próbek do 30% objętości kolumny w ciągu kilku minut dla prac w skali laboratoryjnej. Można stosować do prac z białkami i dużymi peptydami (Mr > 5000 kDa), oraz kwasami nukleinowymi, a także separacji wyznakowanych biocząsteczek od niezwiązanego znacznika. Złoża WorkBeads Dsalt przygotowane są w postaci wstępnie spęczniałych ziaren i dostępne są w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn, oraz w formie gotowych do użycia kolumn GoBio.
Kontakt
LKB Biotech Violetta Kochmańska Spółka Jawna
KRS 0000355399 REGON 142404842 NIP 7010234826
ADRES
al. Bohaterów Września 9 lok.115
02-389 Warszawa
ZADZWOŃ
tel. +48 22 662 21 29
fax +48 22 658 00 89
KSIĘGOWOŚĆ
JOANNA WILKOWSKA
tel. +48 728 354 796
joanna.wilkowska@lkb-biotech.pl
WSPÓLNICY
VIOLETTA KOCHMAŃSKA
tel. +48 519 310 900
violetta.kochmanska@lkb-biotech.pl
JACEK GIERCZAK
tel. +48 792 592 509
jacek.gierczak@lkb-biotech.pl
USŁUGI IT
KRZYSZTOF KOCHMAŃSKI
tel. +48 535 471 715
krzysztof.kochmanski@lkb-system.pl
MAGDALENA KOCHMAŃSKA
magdalena.kochmanska@lkb-system.pl
MATEUSZ KOCHMAŃSKI
mateusz.kochmanski@lkb-system.pl
OFERTY I ZAMÓWIENIA
INFORMACJE
Wymieniacze jonowe WorkBeads
Wymieniacze jonowe WorkBeads są idealne zarówno do celów preparatywnych, jak i analitycznych. Wykazują doskonałe wyniki dla większych peptydów, zwłaszcza dla insuliny. Dostępne są złoża o dwóch różnych rozmiarach ziaren (WorkBeads 40S – 45 µm i WorkBeads 100S – 90-110 µm), zapewniające optymalną czystość na wszystkich etapach procesu oczyszczania. Przeznaczone są do oczyszczania białek i peptydów na skalę laboratoryjną i przemysłową. Charakteryzują się wysoką stabilnością chemiczną ułatwiającą czyszczenie użytego złoża oraz wysoką zdolnością wiąznia białek i peptydów przy dużych prędkościach przepływu. Wymieniacze kationowe WorkBeads 40S i WorkBeads 100S Złoża WorkBeads 40S i WorkBeads 100S i wymieniacze anionowe WorkBeads 40Q i WorkBeads 100Q (z silnym ligandem anionowym), oraz WorkBeads 40 DEAE (ze słabym ligandem anionowym) dostepne są w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn oraz w kilku rodzajach kolumn GoBio oraz OptioBio 10×100.
Multimodalna chromatografia jonowymienna
jest również określana jako chromatografia jonowymienna w trybie mieszanym. Wykorzystuje oddziaływanie jonowe w połączeniu z oddziaływaniem hydrofobowym i innymi rodzajami oddziaływań. Połączony efekt daje złożu wyjątkową selektywność, która daje nowe możliwości w separacji biomolekuł. Złoże WorkBeads 40 TREN ma ligand, który jest naładowany dodatnio poniżej pH 9 i może być używane do różnych zastosowań, zwłaszcza ze względu na wyższą tolerancję soli, między innymi do oczyszczania przeciwciał monoklonalnych (mAb) w celu ochrony kolumny z białkiem A przed wirusami i innymi zanieczyszczeniami materiałem komórek gospodarza lub jako etap doczyszczania w procesie oczyszczania mAb. Złoże WorkBeads 40 TREN dostępne jest w formie zawiesiny do samodzielnego upakowania kolumn oraz w kilku rodzajach kolumn GoBio.
Zestawienie ligandów oferowanych na złożach do chromatografii IEX
Zestawienie ligandów oferowanych na złożach do chromatografii IEX